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以human p53为例,利用Primer3web在线进行mRNA引物设计。
1.寻找基因序列
PubMed官网: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/
下拉条目选择核苷酸:Nucleotide
输入基因+物种+mRNA:p53 human mRNA
点击搜索:Search

Molecule types选择 mRNA

单击进入(Homo sapiens mRNA for P53, complete cds)此条目进入我们所寻找的p53 human mRNA 详细信息页面。

页面下拉点击CDS。

右下角点击FASTA

之后会出现以下Homo sapiens mRNA for P53, complete cds 信息页面。

2.基因信息输入
Primer3web官网:http://primer3.ut.ee/
进入Primer3web官网后,输入我们刚刚获取的基因信息。
物种选择HUMAN,粘贴CDS,单击Pick Primers(获取引物)

3.参数设置
有特殊要求的参数可以下拉首页页面在此设置,可根据自己的设计需要对参数进行设置。

4、引物序列输出
在获取的结果中,有4对引物供选择。

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