Flowjo之多色补偿调节:传统补偿调节和自动荧光补偿
南京福麦斯生物
2025年02月17日 18:50
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Flowjo安装包下载

导入样本,选中Compensation补偿组,点击菜单栏的彩虹桥补偿选项;

此时出现补偿界面,参数、样本、补偿名称、阴性对照和阳性对照需要一一对应,如不对应parameter左侧会亮黄灯或者红灯,此时则需检查调整。将鼠标光标放在红灯上,会出现报错原因,根据提示进行调整。若认为补偿管的阴性群和阳性群的设门不合适,可进行调整可双击直方图,通过T键进行调整;

补偿设置完成,可点击View Matrix查看补偿矩阵。

在补偿矩阵中若觉得补偿不合适,点击Edit,便可复制一个新的补偿矩阵,进行编辑,编辑合适后,点击补偿矩阵上方的M,拉到样本处,便可以将补偿应用到某个样本或者group;

导入或导出补偿:点击Save Matrix-Flowjo Matrix File,保存到熟悉的路径即可导出补偿。点击左下角“+”,选中需要导入的补偿文件,即可导入。

AutoSpill自动荧光补偿

Flowjo10.7.0及以上版本全面升级,内嵌AutoSpill算法,无需圈取阳性群,一键自动补偿。此外,AutoSpill功能可用于去除由于自动荧光产生的信号。

将单染管全部拖拽到Compensation组,选中Compensation组,点击菜单栏的彩虹补偿选项。

此时出现一个新的补偿界面,参数、样本、补偿名称、阴性对照和阳性对照需要一一对应,如不对应需要进行调整。点击AutoSpill/AutoSpread,点击View Matrix,即可得到自动补偿矩阵。

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