如何用Image lab分析Western Blot条带？（附安装包）

南京福麦斯生物

2024年12月12日 15:44

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Image Lab软件是一款可用于采集和分析凝胶电泳和印迹膜数字图像的图像分析工具。软件的主要功能一是采集图像，采集图像需要搭配伯乐的仪器使用；另外一个功能是进行图像分析。

以下分享如何用Image lab分析Western Blot条带。（Image lab安装包及安装教程在本文第2部分）

一、定量分析

1.首先打开你要分析的数据，一般是scn这个格式才能打开，也就是说用这个软件曝光的才能用这个软件来统计。

2.选择左侧的体积工具，选择矩形

3.用鼠标圈中你分析的条带。

4.然后复制这个矩形，粘贴8个。

5.分别圈住所有的条带。

6.然后点一下分析表，就出现了下面的表格。

7.然后选择表格上面最右侧的按钮，导成Excel文件。

8.一般背景深的话，选调整体积。

徒手圈也可以，但是手太抖，我每次都画不好。这样可以知道大概的趋势。也可以选择哪一个泳道的条带为1，双击该矩形，会出现“体积类型”、“数量”、“参考体积”等选项，打勾“参考体积”，确定。

9.然后点击“分析表”，各种定量结果会显示出来。同样选择从左数第四个按钮“将分析表导出至文件”，选择相对定量。

方法二

1.首先打开Image lab，打开一张Image lab电泳图片。点击泳道和条带，找到泳道下手动功能，输入泳道号，我们一共有8个条带，输入8。

2.在“所有泳道”功能下面可以选择调整泳道框的大小。在“单个泳道”下面，具有几个功能项，点击“移动”把框与条带一一对应。还可以调整单个框的宽度，点击“宽度”功能。下图整体调整的。

此图为单个调整过的。

3.把所有条带都限定在框内之后，然后选择上面的“条带”功能下面的“检测条带”，有些选项可以自己调整，比如灵敏度之类，之后会自动识别条带。

条带检测选项如下： 低条带检测灵敏度：

此选项为具有明显条带的图像设置低级检测。不使用此设置检测模糊条带。

高条带检测灵敏度：

此选项为模糊图像设置较高级别的检测。可以使用分析工具箱中的条带工具移除无关条带。

自定义:

可以设置介于 1 到 100 之间的数值以选择样本的最佳检测灵敏度。注意：使用低条带检测灵敏度或高条带检测灵敏度时，应设置以下数值：低灵敏度 = 25 ；高灵敏度 = 75。

4.扣除泳道背景：泳道背景扣除通过选择 “ 背景扣除 ” 字段中的 “ 启用扣除 ”，执行基于泳道的背景扣除。

使用 “ 泳道轮廓 ” 视图可以查看扣除的泳道背景。

圆盘大小 — 可以指定假设圆盘的大小（介于 1 和 99 mm 之间），根据泳道长度移除背景。圆盘的大小可确定扣除的背景数量。大圆盘跟随轮廓轨迹的脚步不是很紧，沿轨迹接触的点较少，移除的背景也较少。小圆盘跟随轮廓轨迹的脚步较紧，移除的背景也较多。圆盘半径太大，会导致背景移除不理想。圆盘半径太小，可能会扣除实际数据。对于大多数样本，≤10 mm 的大小通常较为合适。可以多次执行此任务，直到对移除的背景数量感到满意为止（和之前quantity one一个道理）。

5.退回到“分析工具箱”，选择“定量工具”，相对和绝对定量可以自己决定。选择“相对”，然后点击“选择”即选择哪一个泳道的条带为1，其余相对于其进行比较。选择之后，下一步点击工具栏中的“分析表”选项，每个泳道的定量结果就会显示出来。选择结果上面的“将分析表导出至文件”按钮，结果会以Excel表格形式自动导入你所打开的WB图像的文件中。