感动哭II终于有人把QPCR实验一次性说清楚了
2️⃣它是怎么完成扩增的？
👉通常一次PCR反应进行30-35个循环，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍
3️⃣PCR实验原理图？
4️⃣实验前，需要提前准备什么？
DNA聚合酶一般分为普通的Taq聚合酶和高保真性聚合酶
若只是判断PCR产物是否存在特异性序列，选普通Taq聚合酶；若想要得到没有任何突变的PCR产物，需选择高保真聚合酶（以上是一般实验思维选择）
👉还需注意，进行T载体连接时，要了解高保真的聚合酶所得的产物是没有A末端的，因此在T载体连接之前需要进行加A反应。或者直接选用普通的Taq聚合酶
顶部