荧光定量PCR(SYBR/RT-qPCR) cDNA稀释方法

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2021-07-13 11:11:37
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cDNA应该稀释多少倍呢,很多小伙伴有疑问。   cDNA稀释的倍数是由后续的qPCR的Ct值来决定的,也就是说后续的qPCR得到的Ct值最优是在14-30之间。那怎么实现这一点呢?   一定范围内,cDNA每多稀释一倍,Ct值增加1。比如cDNA稀释5倍的Ct值是28,那稀释10倍的Ct值在29。通过预实验,以此原理来调整稀释倍数,也可以梯度稀释cDNA得到的Ct值来确定一个稀释倍数。这还是比较麻烦的,常见的cDNA稀释倍数在3-10倍之间。不稀释的cDNA不要超过qPCR体积的1/10。
PCR试剂找新贝生物,19512125884
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