试剂简介：

Fluo-4 AM是最常用的检测细胞内钙离子浓度的荧光探针之一。

分子式为C51H50F2N 2O23，分子量为1096.95，CAS：273221-67-3。

Fluo-4 AM在Fluo-3 AM的基础上改进而成，其特点是加载较快并且在相同条件下荧

光明亮。Fluo-4 AM将Fluo-3 AM结构中的氯原子替换成了氟原子，导致它的激发波

长会向短波长处偏离12nm左右。这个波长接近于氩激光器的波长488nm，所以用

氩激光器激发时，Fluo-4的荧光强度会比Fluo-3强一倍。由于Fluo-4与钙离子的亲

和力和Fluo-3相近，所以使用上和Fluo-3也基本相同，可以使用激光共聚焦显微

镜、荧光酶标仪等荧光检测仪器来测定细胞内钙离子浓度的变化。Fluo-4AM的结构

式参考图如下。

Fluo-4 AM是Fluo-4的乙酰甲酯衍生物，是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo-4

AM的荧光非常弱，其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。Fluo-4 AM进入细胞后可

以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-4，从而被滞留在细胞内。Fluo-4可以和钙离子结

合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，激发波长为494nm，发射波长为516nm。

实际检测时推荐使用的激发波长为488nm左右，发射波长为512-520nm。

用于细胞内钙离子检测时，Fluo-4 AM的常用浓度为0.5-5µM。通常用含有0.5-5µM

的Fluo-4 AM的适当溶液和细胞一起在20-37ºC孵育10-60分钟进行荧光探针装载，

随后适当洗涤，洗涤后可以考虑适当再孵育20-30分钟以确保Fluo-4 AM在细胞内充

分转变成Fluo-4。

本Fluo-4 AM（钙离子荧光探针）是配制于无水DMSO (anhydrous DMSO)中的储

存母液，浓度为2mM。

保存条件：

-20ºC避光保存，6个月有效。

注意事项：

【1】Fluo-4 AM遇水极易分解，建议第一次使用时，母液分装并密封保存，同时注意保持干燥。

【2】Fluo-4 AM在4C、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖

内，可以20-25C水浴温育片刻至全部融解后使用。

【3】探针的工作浓度、细胞量、孵育温度和时间等需要根据不同实验预先摸索。

【4】荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

【5】本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或

药品，不得存放于普通住宅内。

【6】为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

关联试剂：

SPQ氯离子荧光探针

Lucigenin光泽精

BCECF酸，荧光 pH指示剂

Fura-FF AM，Cell Permeant

Cal-630 AM，Cell Permeant

Rhod-5N AM，Cell Permeant

Cal-590 AM，Cell Permeant

Fura-FF AM，Cell Permeant

Cal-630 AM，Cell Permeant

Rhod-5N AM，Cell Permeant

Fluo-5N AM，Cell Permeant

Fluo-8 Sodium Salt，Cell lmpermeant

DyLight 488 labeled Lycopersicon Esculentum (Tomato) Lectin

DyLight 594 labeled Lycopersicon Esculentum (Tomato) Lectin

【文章编辑：强化生物xxn】